tilbage

KLONING AF PLANTEN ”SAINT PAULIA” 

FORMÅL: At klone en plante og demonstrere plantehormoners indflydelse på  vækst og formdannelse

 BAGGRUND: Planters vækst og formdannelse(morfogenese) styres gennem en balance mellem hovedsagelig 2 typer af plantehormoner, cytokininer (dannes i rodspidser) samt auxiner (dannes i skudspidser og unge blade). Således betegner man traditionelt cytokininerne for skuddannende hormoner og auxinerne for roddannende hormoner. I virkeligheden er dette en forsimpling idet der i alle tilfælde er tale om en balance.

Ved at ændre på niveauet af hormonerne i kunstige sterile dyrkningssubstrater kan man , afhængig af planteart, fremprovokere ”unormal” vækst, hvilket  udnyttes i praksis til formering i stor skala af en ønsket plantetype. F. eks. kan man  anbringe bladstykker af  potteplanten ”Saint Paulia” på et substrat , der indeholder relativt meget cytokinin. Efter 4-5 uger vil der  på bladoverfladen fremkomme små skud dannet ud fra enkeltceller i bladvævet. Disse skud kan overføres enkeltvis eller i klumper til et substrat indeholdende relativt meget auxin, og de vil nu danne rødder og  udvikles til små planter, der senere kan dyrkes på normal vis i jord.

FORSØGSUDSTYR: LEVERES:  Reagensglas med steril plante af Saint Paulia, 15 petriskåle med dyrkningssubstrat til skuddannelse ( mrk. S) samt 15 petriskåle med substrat til roddannelse (mrk. R) samt 2 tomme petriskåle.

Bestil her

IKKE LEVERET: Pincet, skalpel, bunsenbrænder, 70% sprit. Man kan med fordel arbejde i en såkaldt LAF bænk (sterilbænk).

FORSØGETS GENNEMFØRELSE: Arbejdspladsen aftørres med 70% alkohol, bunsenbrænderen tændes og anbringes i umiddelbar nærhed , skalpel og pincet steriliseres i flammen og afkøles.

Proppen  på glasset med den sterile plante fjernes, og med den sterile pincet tages et blad og overføres til enten bund eller indersiden af låg  på en tom petriskål. Med skalpellen deles bladet på langs i 2 dele, disse overføres MED OVERSIDEN NEDERST til petriskålen mærket S. Der kan udmærket være flere blade i en petriskål. Husk, at låget kun må løftes væk i så kort tid som muligt. Det er godt at sterilisere skalpel  og pincet gentagne gange mellem de enkelte overførsler.

Efter endt arbejde tapes petriskålene til langs med kanten og stilles et lunt sted i lys, dog ikke i direkte solskin!!. Enkelte celler i bladet vil nu efterfølgende under indflydelse af det relativt høje cytokininindhold i petriskålen udvikle sig til små skud.

Efter 3-4 uger vil disse vise sig på overfladen. Når de er ca. 3 mm store, skal de overføres til  et roddannende substrat (petriskålene mærket R med et relativt højt indhold af auxin). (Undertiden dannes der allerede i første fase ”luftrødder”). Fremgangsmåden er den samme som i første omgang. Det er lettere at overføre ”klumper” af skud i stedet for at forsøge at adskille de enkelte skud, herved mindskes faren for forurening ligeledes. Petriskålene mærket R tapes som tidligere til i kanten og stilles igen lunt og i lys.

Man vil nu efterfølgende kunne iagttage skuddene udvikle sig til små normalt udseende planter med rod , stængel og blade.

Har man lyst, kan man på et senere tidspunkt prøve at dyrke de fremkomne planter i jord på  normal vis. 

Hvis man har været omhyggelig, vil man på denne måde på meget kort tid have fået opformeret en oprindelig plante til mange  ens individer, en klon, og det er, hvad der praktiseres med f.eks. kartofler, jordbær og Saint Paulia samt en mængde andre plantearter, der ikke formeres ved frø.